توسعه یک روش PCR جهت تشخیص آلودگی های مایکوپلاسما در رده های سلولی و فراورده های بیولوژیکی

Authors

  • شاه حسینی, محمد حسن دانشگاه آزاد اسلامی. واحد شهر قدس، گروه میکروبیولوژی، تهران- ایران
  • مهاجرانی, حمید رضا دانشگاه علوم تحقیقات اراک، گروه میکروبیولوژی، اراک-ایران
Abstract:

سابقه و هدف : آلودگی لاین های سلولی و فراورده های بیولوژیکی یکی از مشکلات عمده تکنیک کشت سلولی می باشد. تشخیص سریع و دقیق آلودگی مایکوپلاسما قسمت مهمی از کنترل آزمایشگاه های کشت سلول است، وباید روشی در هر آزمایشگاه کشت سلول وجود داشته باشد. سلول های آلوده منتهی به نتایج غیر قابل اطمینان می شود، بنابراین نیاز به یک روش مطمئن در آزمایشگاه امری ضروری می باشد. واکنش زنجیره ای پلیمراز یک تکنیک سریع، حساس و با ویژگی بالا در تشخیص باکتریها به شمار می رود. هدف از این مطالعه بررسی کارآیی PCR در شناسایی آلودگیهای کشت سلول و سایر فرآورده های بیولوژیک است. مواد و روش ها: در این مطالعه ابتدا تکنیک PCR با استفاده از پرایمرهای MGSO و GPO-1و هدف ژنی 16SrRNA بهینه گردید. همچنین روشPCR مورد استفاده از لحاظ حساسیت و ویژگی بررسی گردید. سرانجام DNAبه روشی ساده از 72 لاین سلولی استخراج و با PCR آزمایش شد. یافته ها: محصول 715 جفت بازی توسط پرایمرها تکثیر و از طریق تعیین توالی تائید گردید. در بررسیهای ویژگی، با هیچکدام از DNA های تست شده محصولی تکثیر نشد. این روش دارای حساسیتی در حد 10 کپی از ژنوم هدف بوده و با DNA میکروارگانیسم های دیگر، آمپلیکون ناخواسته ای مشاهده نشد.  نتیجه گیری: نتایج حاصله از این مطالعه مشخص می کند که این روش مولکولی در تشخیص آلودگی مایکوپلاسما در کشت های سلولی و فراورده های بیولوژیک از حساسیت و ویژگی بالایی برخوردار می باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

توسعه یک روش pcr جهت تشخیص آلودگی های مایکوپلاسما در رده های سلولی و فراورده های بیولوژیکی

سابقه و هدف : آلودگی لاین های سلولی و فراورده های بیولوژیکی یکی از مشکلات عمده تکنیک کشت سلولی می باشد. تشخیص سریع و دقیق آلودگی مایکوپلاسما قسمت مهمی از کنترل آزمایشگاه های کشت سلول است، وباید روشی در هر آزمایشگاه کشت سلول وجود داشته باشد. سلول های آلوده منتهی به نتایج غیر قابل اطمینان می شود، بنابراین نیاز به یک روش مطمئن در آزمایشگاه امری ضروری می باشد. واکنش زنجیره ای پلیمراز یک تکنیک سریع،...

full text

استفاده از روش Fast PCR جهت تشخیص گونه های فاسیولا

Background and purpose: Fasciola hepatica and Fasciola gigantica are common liver flukes that are the etiological agents of fasciolosis, which affects both domestic livestock and humans worldwide. In the present study we established a rapid, easy and also accurate tool, for differentiation between F. hepatica and F. gigantica using Fast PCR. Material and methods: Thirty adults of Fasciola spec...

full text

تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت سلول به روش PCR

مقدمه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی در شرایط آزمایشگاه با گونه های مایکوپلاسما می تواند به مشکلاتی در ارگانیسم های زنده منجر شود. بنابراین، تهیه یک پروتکل تشخیص روتین برای عفونت های مایکوپلاسمایی، جهت به دست‌ آوردن نتایج تحقیقاتی قابل اعتماد، ضروری و انکارناپذیر است. به دلیل محدودیت در روش های متواتر، این اواخر تکنولوژی هایی بر پایه اسید نوکلئیک خصوصا روش های بر پایه واکنش زنجیره ای پلیمراز (P...

full text

شناسایی آلودگی مایکوپلاسما اوراله در کشت های سلولی با استفاده از روش pcr

زمینه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئله ای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می شود. میزان بالایی از کشت های سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت می گیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن به منظور جلوگیری از زیان های مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگان ها(microorganisms) بسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه اندازی و به کارگیری روش واکنش...

full text

شناسایی آلودگی مایکوپلاسما اوراله در کشت‌های سلولی با استفاده از روش PCR

زمینه و اهداف: آلودگی کشت‌های سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئله‌ای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می‌شود. میزان بالایی از کشت‌های سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت می‌گیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن به‌منظور جلوگیری از زیان‌های مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگان‌ها(Microorganisms) بسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه‌اندازی و به‌کارگیری روش واکنش...

full text

تشخیص آلودگی جوجه های گوشتی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم با روش الایزا (ELISA) و واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) ارجاعی به آزمایشگاه تشخیص دامپزشکی شهرستان گرگان

 مقدمه و هدف: مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و مایکوپلاسما سینویه بعنوان مهمترین پاتوژن های مایکوپلاسمایی در طیور محسوب می شوند که ضررهای اقتصادی شدیدی را بر صنعت طیور در سرتاسر دنیا وارد می سازند. آلودگی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در جوجه ها باعث بیماری مزمن تنفسی و در نتیجه کاهش تولید گوشت و تخم می شود. به دلیل اینکه برنامه های کنترلی موفق بستگی به تشخیص صحیح و به موقع گله های آلوده دارند. بن...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 4  issue None

pages  41- 46

publication date 2014-04

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023